车前提取物抗痛风活性及化学成分研究

硕士学位申请者：毕莹

指导老师：曾金祥副教授

论文摘要：

车前科(Plantaginaceae)车前属(genera Plantago)植物大粒车前(Plangtagoasiatica L.)或平车前(Plantago depressa Willd)的干燥全草和种子长期作为利尿中药材使用。近年来，有研究表明车前具有抗痛风效果，但其作用机制及物质基础尚缺少进一步研究。本文以江西九江产的车前草和车前子为研究对象，考察二者提取物抗痛风活性与机制，并应用现代分离制备技术和结构鉴定方法对车前子化学成分进行提取、分离、鉴定，以期为车前的抗痛风新药开发提供理论与物质基础。本文主要方法与研究成果如下：

1.以氧嗪酸钾诱导小鼠急性高尿酸血症模型，研究车前草提取物对急性高尿酸血症小鼠血清尿酸与肌酐水平及肝脏黄嘌呤氧化酶（XOD）与腺苷脱氨酶（ADA）活性的影响，并采用现代分子生物学技术研究车前草提取物对急性高尿酸小鼠肾脏尿酸转运体mURAT1 mRNA表达的调节作用。结果发现与模型组相比，车前草提取物不同给药剂量组可显著降低小鼠血清尿酸与肌酐水平和肝脏XOD及ADA活性，并能下调肾脏mURAT1 mRNA的表达。结果表明，车前草抗痛风机制可能在于其抑制小鼠肝脏XOD与ADA活性并下调肾脏尿酸转体mURAT1 mRNA的表达。

2.以氧嗪酸钾诱导小鼠急性高尿酸血症模型，研究车前子提取物对急性高尿酸血症小鼠血清尿酸与肌酐水平及肝脏黄嘌呤氧化酶（XOD）与腺苷脱氨酶（ADA）活性的影响，并采用现代分子生物学技术研究车前子提取物对急性高尿酸小鼠肾脏尿酸转运体mURAT1 mRNA表达调节作用。研究发现车前子与车前草具有相似的抗痛风作用及机制，但其抗痛风效果优于车前草。

3.以氧嗪酸钾诱导小鼠急性高尿酸血症模型，研究车前子提取物石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、水部位对小鼠血清尿酸水平及肝脏黄嘌呤氧化酶（XOD）活性的影响。结果表明车前子提取物不同极性部位均可有效降低小鼠血清尿酸水平并抑制肝脏黄嘌呤氧化酶活性，但提取物正丁醇部位具有最佳的降尿酸效果且对小鼠肝脏黄嘌呤氧化酶抑制活性最强。

4.以90Kg车前子为原料并粉碎，采用石油醚回流脱脂，65%乙醇渗漉提取得车前子总提物。以HP-20大孔树脂对总提物进行部位划分，利用正/反相硅胶、MCI CHP-20P树脂、HP-20大孔树脂、Sephadex LH-20凝胶、聚酰胺柱色谱技术结合高压制备色谱技术分离纯化化合物，根据理化性质和NMR波谱学方法鉴定所制备化合物的结构。共得到五个化合物，经鉴定分别为毛蕊花苷、异毛蕊花苷、去咖啡酰基毛蕊花苷、肉豆蔻酸、bis(2-ethythexyl)benzene-1,2-dicar- boxylate。

关键词：车前子；车前草；抗痛风；黄嘌呤氧化酶；物质基础

硕士期间发表学术论文：

[1]曾金祥，毕莹，魏娟，等.车前草提取物降低急性高尿酸血症小鼠血尿酸水平及机理研究[J].时针国医国药，2013，24(9)：2064-2066.
[2]曾金祥，毕莹，许兵兵，等.车前子提取物部位群抗痛风的作用[J].中国实验方剂学杂志，2015，21（8）：147-151
[3]曾金祥，毕莹，等.车前子化学成分研究[J].中药材杂志，（已录用）。